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    人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A

    更新時(shí)間:2022-10-24

    簡(jiǎn)要描述:

    “人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A "采用雙抗體夾心ELISA法,本試劑盒適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本,靈敏度*,多年專(zhuān)業(yè)酶免服務(wù),從標本收集、保存、預試驗、實(shí)驗、數據分析等全實(shí)驗過(guò)程我司提供完整的技術(shù)指導。

    型號:人CyPA試劑盒96人份/48人份點(diǎn)擊量:2983

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    【產(chǎn) 品 名 稱(chēng)】:人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A     
    【英 文 名 稱(chēng)】:Human cyclophilin A,CyPA ELISA KIT    
    【經(jīng) 營(yíng) 品 牌】:RD 、 RB、 IBL,提供免費待測服務(wù)!
    【產(chǎn) 品 包 裝】:96T/48T
    【保 存 條 件】:2-8℃
    【供應 商】:上海恒遠ELISA試劑盒供應商(國內供應商)
    【檢測標本標本】:血清或血漿/本產(chǎn)品僅供科研使用
    ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。   
    原理
      ELISA是以免疫學(xué)反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實(shí)際應用中,通過(guò)不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
    注意事項
      1. 正式試驗時(shí),應分別以陽(yáng)性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實(shí)驗結果的準確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
      2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
     ?。?) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
     ?。?) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
     ?。?) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗系統里準確地滴定其工作濃度。
     ?。?) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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